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                血液中酒精檢測分析方案

                時間:2020-11-10 10:26:09 作者:admin
                 

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                血液中酒精檢測分析方案

                一、原理

                本方法利用酒精(以下稱乙醇)的易揮發性,以叔丁醇為內標,用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器進行檢測:經與平行操作的乙醇標準品比較,以保留時間或相對保留時間定性,用內標法以乙醇對內標物的峰面積比進行定量分析。

                二、試劑

                本標準所用試劑除另有說明外均為色譜純,試驗用水為二級水(見GB/T6682-2008規定)

                a)乙醇

                b)叔丁醇

                c)乙醇標準工作溶液:精密吸取或稱取無水乙醇標準品適量,用水配1000mg/100m乙醇儲備液,密封,冷藏保存,使用期6個月。將乙醇儲備液按倍數用水稀釋制成試驗中所用系列濃度的乙醇標準工作溶液,使用期3個月

                d)叔丁醇內標工作溶液:精密吸取或稱取叔丁醇標準品適量,用水配成4mg/100mL叔丁醇內標工作溶液,密封,冷藏保存,使用期3個月。

                三、器材

                頂空氣相色譜檢驗方法應具備以下器材:

                a)氣相色譜儀:配有氫火焰離子化檢測器(FID):

                 

                聯眾分析儀器:

                b)頂空自動進樣器

                c)分析天平:感量0.1mg:

                d)精密移液器

                e)樣品瓶:

                f)硅橡膠墊:

                g)鋁帽:

                h)密封鉗

                四、操作方法

                1定性分析

                1.1樣品制備

                1.1.1案件樣品制備

                取0.10mL待測全血及0.50mL叔丁醇內標工作溶液加入樣品瓶內,蓋上硅橡膠墊,用密封鉗加封鋁帽,混勻,待測

                1.1.2空白樣品和添加樣品制備

                取1mg/100mL乙醇標準工作溶液0.10m及叔丁醇內標工作溶液0.50mL加入樣品瓶內作為檢測限添加樣品,另取空白全血0.10mL及叔丁醇內標工作溶液0.50mL加入樣品瓶內作為空白樣品。按7.1.1.1方法操作,與案件樣品進行平行對照分析。

                1.2.2頂空進樣分析參考條件頂空自動進樣器參考條件

                a)加熱箱溫度:65℃

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                b)定量環溫度;105℃

                c)傳輸線溫度:110℃:

                d樣品瓶加熱平衡時間:10.00min

                e)樣品瓶加壓時間:0.10min

                定量環充滿時間:0.10min

                g)定量環平衡時間:0.05mi

                h)進樣時間:1.00min

                1.2.3進樣

                將已制備的樣品置于頂空自動進樣器樣品架上,編制進樣方法并運行

                1.3記錄與計算

                分別記錄各樣品中叔丁醇、乙醇標準品和可疑乙醇峰的保留時間,計算各樣品中乙醇相對于叔丁醇

                的相對保留時間值。

                2定量分析

                2.1樣品制備

                2.1.1案件樣品制備

                取0.10mL待測全血兩份,分別添加0.50mL叔丁醇內標工作溶液,樣品制備同1.1.1

                2.1.2校準曲線制備

                配置系列濃度的乙醇標準工作溶液。取系列濃度的各標準工作溶液0.10m及叔丁醇內標工作溶液

                0.50mL,分別加入樣品瓶內,樣品制備同1.1.1

                制備校準曲線的乙醇標準工作溶液系列濃度應不少于六個階梯濃度,且待測樣品乙醇的濃度應在校

                準曲線的線性范圍內

                2.2檢測與記錄

                按1.2操作,記錄案件樣品和系列濃度的標準工作溶液樣品中乙醇和叔丁醇的峰面積值

                2.3計算

                2.3.1校準曲線

                用系列濃度的標準工作溶液樣品中的乙醇與叔丁醇峰面積之比對乙醇質量濃度進行線性回歸得線

                性方程。

                2.3.2定量

                根據案件樣品中乙醇及內標叔丁醇峰面積值,按照式(1)計算案件樣品中的乙醇含量X=(Y-a)/b

                式中    

                 x案件樣品中的乙醇含量,單位為毫克每100毫升(mg/100mL)

                Y—案件樣品中乙醇及內標叔丁醇的峰面積比;

                a線性方程的截距

                b線性方程的斜率。

                 

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                五、結果評價

                1定性結果評價

                1.1陽性結果

                空白樣品中未出現乙醇的色譜峰為正常添加樣品中同時出現乙醇和叔丁醇的色譜峰為正常??瞻缀吞砑訕悠氛?,案件樣品中色譜峰的相對保留時間(或保留時間)與添加樣品中乙醇的相對保留時間(或保留時間)比較,相對誤差在土2%內,經選擇不同的色譜條件檢測,結果一致時,則認定案件樣品中含有乙醇。

                1.2陰性結果

                空白和添加樣品正常,案件樣品的叔丁醇色譜峰正常,而無乙醇的色譜峰時,則認定檢驗結果為陰性。若空白和(或)添加樣品結果異常,說明操作有誤,結果無效,應重新檢驗。

                1.3檢出限

                本方法測定血液中乙醇的檢出限為1mg/100mL

                B.2定量結果評價

                2.1校準曲線

                乙醇含量校準曲線的線性相關系數r不小于0.999,校準曲線有效。

                2.2定量結果

                平行測定的兩份案件樣品測定結果的相對相差不超過0%(有凝血塊的血樣不得超過15%)時,定量結果有效,定量結果按兩份案件樣品測定結果的平均值計算,否則需要重新進行測定。

                2.3定量陽

                本方法測定血液中乙醇的定量限為5mg/100mL案件樣品定性分析結果為陽性,定量分析乙醇含量小于5mg/100mL時,檢測結果為血中檢出乙醇,其含量小于5mg/100m4



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